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3、重组各因素对AFB1降解率的漆酶影响
由图5A可以看出,漆酶与AFB1孵育时,降解接分结构解析当孵育时间在12~24h内,黄曲降解率逐渐升高,霉毒时间大于24h,分对降解率趋于稳定为90.33%;由图5B可以看出,析及在25~30℃范围内,产物AFB1降解率基本保持不变,重组在35℃达到为大值77.45%,漆酶当温度在35~40℃范围内,降解接分结构解析降解率降低,黄曲当温度大于40℃时,霉毒略微升高,分对与大多数真菌漆酶一样,析及LAC3是一种相当耐温的酶,但是耐热性是关于曝光时间的函数,当温度高于40℃,该酶在此条件暴露12h后可能导致失活较快,活性降低;由图5℃可以看出,在实验条件范围内,毒素的降解率随漆酶酶活力的增加而逐渐升高,当酶活力达到3U时,AFB1的降解率达到峰值74.87%,继续加大酶量,降解率基本不在增长。
4、响应面法优化漆酶降解AFB1条件
在单因素试验基础上,选择孵育时间(A)、孵育温度(B)、酶活力(C),以AFB1的降解率(Y)为响应值,其中-1、0、1分别代表低、中、高3个水平,试验设计与结果见表3。将数据结果进行多元回归分析,得到回归方程:
Y=-504.54600+8.95888A+22.91040B+3.40289C--0.10758AB-0.00550AC-0.037775BC-0.16133A2-0.26762B2-0.012395C2
由表4可知,模型P值小于0.0001,表明该模型极显著,失拟项P值大于0.05,表明失拟项验证不显著,说明回归方程可靠可以用于AFB1最高降解率条件的预测。A和B对AFB1的降解影响极显著,A2和C2对AFB1的降解影响显薯,表明孵育时间、孵育温度和酶活力对AFB1的降解有显著的影响,影响程度从大到小为孵育时间>孵育温度>酶活力。
5、AFB1降解条件的响应面分析
从图6a可以看出,孵育温度对应的响应值的曲线陡峭,表明对AFB1降解率影响较大,而孵育时间对应的响应值的曲线相对平缓,表明孵育时间对AFB1降解率的影响不大,孵育时间和孵育温度的等高线扁平,表明孵育温度和孵育时间的交互作用对AFB1降解率的影响较大;
从图6b可以看出,酶活力对应的响应值的曲线陡峭,说明对AFB1的降解率影响较大,而孵育时间对应的响应值曲线相对平缓,表明孵育时间对AFB1降解率的影响不大,酶活力和孵育时间的等高线近似圆形,表明酶活力和孵育时间的交互作用对AFB1降解率的影响较小;从图6c可以看出,酶活力对应的响应值曲线相对较陡,而孵育温度对应的响应值曲线较平缓,表明酶活力对AFB1降解率影响较大,酶活力和孵育温度的等高线扁平,表明酶活力和孵育温度的交互作用对AFB1降解率的影响较大。
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相关链接:漆酶,酶,响应面法
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