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2.2 固体发酵培养基的茶籽优化
2.2.1 茶籽饼与麦麸的添加比例
改变培养基中茶籽饼与麦麸的添加比例(95∶5、90∶10、饼生85∶15、物脱80∶20、毒工75∶25)在其他条件不变的艺的优化情况下,32 ℃恒温发酵5 d,茶籽80 ℃烘干后测定培养基中的饼生茶皂素含量并计算茶皂素的降解率,结果见图2。物脱从图2可以看出,毒工当茶籽饼与麦麸的艺的优化添加比例为85∶15时,茶皂素降解率最高(11.29%)。茶籽在一定范围内,饼生茶皂素降解率随茶籽饼比例的物脱增加而增大,说明茶皂素的毒工增加在一定范围内能够加强菌体的生长繁殖能力,但当茶籽饼所占比例过大时,艺的优化培养基中的茶皂素浓度高,对菌体的生长代谢起抑制作用,从而影响对茶皂素的降解率。因此,选择茶籽饼与麦麸的添加比例为85∶15,用于后续研究。
2.2.2 葡萄糖添加量
在其他条件不变的情况下,改变培养基中葡萄糖的添加量,32 ℃恒温发酵5 d,80 ℃烘干后,测定培养基中的茶皂素含量并计算茶皂素的降解率,结果见图3。从图3可以看出,当葡萄糖添加量为2%~3%时,茶皂素降解率随葡萄糖添加量的增加而增加;当葡萄糖添加量为3%时,茶皂素降解率达到33.07%,但当葡萄糖添加量大于3%时,茶皂素降解率显著且持续下降。究其原因,可能是由于培养基中碳含量过高或过低,从而使培养基中的碳氮比例失调,导致菌体生长代谢能力下降。因此,选择3%作为葡萄糖的最佳添加量。
2.2.3 KH2PO4添加量
在其他条件不变的情况下,改变培养基中KH2PO4添加量,32 ℃恒温发酵5 d,80 ℃烘干后测定培养基中的茶皂素含量并计算茶皂素的降解率,结果见图4。从图4可以看出,在一定范围内,茶皂素降解率随KH2PO4添加量的增加而增加,当KH2PO4添加量为0.1%时茶皂素降解率达到41.38%,但当KH2PO4添加量超过0.1%茶皂素降解率随着KH2PO4添加量的增加而下降。磷是微生物细胞中核蛋白、核酸、ATP、磷脂、辅酶等的重要原料,能保持细胞内ATP代谢的平衡,参与调节体内的酸碱平衡,参与体内能量的代谢。若培养基中磷含量不足,会影响微生物的代谢生长速度,但若磷含量超过微生物生长代谢的需要量,则会对微生物的生长起抑制作用。因此,选择0.1%作为KH2PO4的最佳添加量。
2.2.4 MgSO4·7H2O添加量
改变培养基中MgSO4·7H2O的添加量(0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%),其他条件保持不变,32 ℃恒温发酵5 d,80 ℃烘干后测定培养基中的茶皂素含量并计算茶皂素的降解率,结果见图5。从图5可以看出,在一定范围内,茶皂素降解率随MgSO4·7H2O添加量的增加而增加,当MgSO4·7H2O添加量为0.15%时茶皂素降解率最高(48.83%)。镁参与能量代谢、蛋白质和核酸的合成及催化酶的激活和抑制等。若培养基中镁含量过低,会导致细胞膜和核糖体的稳定性降低,对微生物营养的吸收与蛋白质的合成产生影响,从而影响机体的正常生长代谢;若镁含量过高,则会对微生物生长代谢起抑制作用。因此,选择0.15%作为MgSO4·7H2O的最佳添加量。
声明:本文所用图片、文字来源《生物工程学报》2021年2月,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系
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